峰面積是定量分析的基礎，峰面積的變化會(huì )導致精密度、標曲、定量分析等一系列問(wèn)題。

那么，如果遇到峰面積不穩定的情況，我們要怎么辦？讓我們分三種情況分別來(lái)看一看：

一、峰面積變小

1. 儀器漏液

儀器漏液會(huì )導致樣品損失，與正常測定結果相比，會(huì )出現色譜峰減小的情況。

→這種時(shí)候，需要檢查系統壓力，確保所有螺絲或連接處無(wú)漏液情況，排查儀器方面的原因。

2. 樣品穩定性不好

有些樣品自身穩定性不好，配置后，隨著(zhù)進(jìn)樣時(shí)間的推移會(huì )出現降解現象。

→如果連續進(jìn)樣過(guò)程中，主峰的峰面積減小，同時(shí)伴隨雜質(zhì)峰面積增加的情況，建議確認樣品在溶劑或流動(dòng)相中的穩定性情況。

3. 進(jìn)樣瓶中樣品量過(guò)少

當樣品瓶中樣品過(guò)少可能導致進(jìn)樣針未吸取到足夠樣品進(jìn)樣。

→添加樣品或使用內襯管即可解決。

4. 針?lè )迕娣e減小

進(jìn)樣瓶的瓶蓋擰緊后，瓶?jì)葧?huì )出現負壓，可能導致進(jìn)樣器取樣不準確。

→第二次進(jìn)樣時(shí)，由于瓶蓋已經(jīng)有孔，負壓消除后進(jìn)樣峰面積會(huì )恢復正常；也可通過(guò)使用預開(kāi)口進(jìn)樣小瓶來(lái)解決該類(lèi)問(wèn)題。

二、峰面積變大

可能是由于色譜柱或流動(dòng)相條件導致樣品吸附，特別是一些帶電荷情況較為復雜的蛋白或多肽類(lèi)樣品。

→大濃度進(jìn)樣、平衡可能的吸附位點(diǎn)

→更換色譜柱或優(yōu)化方法

（推薦更換MG、MGII、或Proteonavi進(jìn)行嘗試）

▲CAPCELL PAK 聚合物包被結構示意圖

Proteonavi

Proteonavi是采用在多孔球形硅膠填料表面鍵合丁基（C4）的高性能蛋白質(zhì)•多肽分析色譜柱。該填料既具有硅膠類(lèi)填料的高分離能力和耐壓性，又具有耐酸性、抑制蛋白質(zhì)吸附等特長(cháng)。

★ 具備*的耐酸性

★ 填料表面的蛋白吸附，即使樣品量少也能被檢出

★ 可對應從分析到制備的規模擴大化

三、峰面積忽大忽小，變化無(wú)規律

1. 自動(dòng)進(jìn)樣器故障或混入氣泡

→進(jìn)樣過(guò)程中，觀(guān)察進(jìn)樣針中無(wú)氣泡混入，如果自動(dòng)進(jìn)樣器出現故障，需要咨詢(xún)相應品牌儀器工程師。

2. 樣品過(guò)于黏稠會(huì )導致進(jìn)樣不準確

→稀釋樣品通?？梢越鉀Q

3. 進(jìn)樣瓶中混入氣泡

→部分樣品容易混入氣泡，比如一些表面活性劑類(lèi)樣品，觀(guān)察進(jìn)樣瓶中是否有小氣泡，或者對進(jìn)樣瓶進(jìn)行超聲脫氣。

PS: 以上對策主要針對液相分析檢測中出現峰面積不穩的情況，如果在質(zhì)譜分析中出現峰面積不穩，則可能會(huì )有離子化、基質(zhì)效應等其他原因。